科瑞斯生物—流式荧光染料分类【烟台科瑞斯】流式荧光染料（下）

五、 重金属离子

适用于质谱流式分析，不是用荧光素结合的，而是与镧系元素系列中的单个同位素重金属离子结合。

目前商业上有35种镧系金属可用于抗体偶联。

六、 串联染料

串联染料是利用Forster共振能量转移（称为FRET或荧光共振能量转移）原理的特殊类别的荧光分子。串联染料（或荧光团)由两个共价连接的荧光分子组成。一个用作供体分子，而另一个用作受体。这产生了具有供体分子的激发和受体的发射性质的荧光团。

特点:

串联染料非常亮，具有较大的斯托克斯位移值(150-300 nm)，检测低密度的抗原时非常有用。串联染料的稳定性不如供体荧光染料，并且能量转移效率因批次而异，使补偿复杂化。

注:串联染料非常敏感和容易降解。这导致受体发射光损失和供体发射光增强，特别是如果荧光团使用相同激光器激发。例如，如果使用PE和PE-Cy7，并且PE-Cy7荧光团开始降解，则其发射的光将在PE通道中检测到，从而给导致错误的数据。串联染料降解的主要原因之一（除了氧自由基)是暴露于光–这是完全可预防的!所以，当染色细胞时，避免曝光或处于极端的温度变化环境。后一种建议的原因是某些串联染料可能易受细胞介导的解耦影响，因此在低温下减慢细胞代谢可有助于保持稳定性。

七、 核酸染料

核酸染料DAPI可嵌入到DNA双螺旋中。

核酸荧光染料对细胞核染色后定量测量细胞所发出的荧光强度，就可以确定细胞核中DNA、RNA的含量，并可以对细胞周期(如PI，7-AAD， Dyelycle Violet, DAPI)和细胞的增殖状况进行分析，分选染色体(如Hoescht 33342,Chromomycin A3)，利用侧群分析对干细胞进行分选（如Hoescht 33342)，死活细胞区分以及对细菌进行分选。。有多种荧光染料可以对细胞中的DNA或RNA染色，常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst 33342等，RNA染料有噻唑橙、叶啶橙等。

八、 细胞增殖染料

用BrdU（(溴脱氧尿咤啶核苷）孵育细胞，使其掺入细胞DNA合成过程，然后用针对BrdU的抗体和DNA染料染色，便可测量细胞增殖。但是，此方法不适合长期增殖研究。

羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE)可用于跟踪增殖细胞的多次分裂。在合适的浓度下，不影响细胞生长或形态，适合长期增殖研究。

九、 细胞死活染料

细胞活力可以通过排除性染料(如碘化丙啶、DAPI)确定，染料不能固定，仅适用于无感染性且需立即分析的细胞。也可通过染料与细胞内胺类物质的结合检测，胺类染料包括Live/Dead (ThermoFisher)，Zombie (Biolegend)或Fixable Viablity (BD Biosciences)，适用于固定的细胞，适合有传染性细胞、胞内抗原染色的细胞、多聚甲醛固定的细胞。

十、 钙指示剂染料

钙指示剂染料与钙结合后会发生色移，可用于指示细胞和信号传导。

常用的染料仍然是indo-1，即紫外双相钙探针。另外还有fluo-3的Blue-green calcium probes。

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