您当前所在的位置:首页> 供应 > 科瑞斯藻红蛋白抗体标记方案 【烟台科瑞斯】藻红蛋白

科瑞斯藻红蛋白抗体标记方案 【烟台科瑞斯】藻红蛋白

扫描手机查看

分享
  • 产品详情
  • 联系方式

科瑞斯藻红蛋白抗体标记方案 【烟台科瑞斯】藻红蛋白

一、藻红蛋白简介

藻红蛋白是从红藻中分离纯化的,能发出强烈的荧光,具有很好的吸光性能和很高的量子产率, 在可见光谱区有很宽的激发及发射范围。用常规的标记方法可以很方便地将其与生物素、亲和素和各种单克隆抗体结合起来制成荧光探针,用于荧光显微检测、荧光免疫测定、双色或多色荧光分析、癌细胞表面抗原检测、流式细胞荧光测定等抗体荧光标记以及活体成像应用等诊断及生物工程技术。

二、试验材料

藻红蛋白染料 ;PD-10柱(葡聚糖凝胶层析柱 Sephadex G-25M) ,Cytiva 公司产品,产品目录号 No. 17-0851-01;NAP5 柱(葡聚糖凝胶层析柱 Sephadex G-25 DNA grade), Cytiva公司产品,产品目录号 No 17-0853-02;琥珀酰亚胺-4-(N- 甲基马来酰亚胺)环已烷-1-碳酸酯)(SMCC),Thermo公司,产品目录号 No.22360;N-乙基马来酰胺(NEM),Thermo公司,产品目录号No.23030 ;二甲基亚砜(DMSO),Thermo 公司,产品目录号 No. D12345。

三、试验方法

1、藻红蛋白的衍生化

①将琥珀酰亚胺-4-(N-甲基马来酰亚胺)环已烷-1-碳酸酯)(SMCC)溶解于无水二甲基亚砜(DMSO)配制成 10 毫克/毫升的母液,PE与琥珀酰亚胺-4-(N-甲基马来酰亚胺)环已烷-1-碳酸酯) (SMCC)交联摩尔比1:80,铝箔封好后于室温旋转反应 60 分钟,使PE分子上的氨基与琥珀酰胺反应发生衍生化。

②交换缓冲液预先平衡凝胶层析柱,将衍生化的PE过柱,收集蛋白峰。

2、抗体的处理

①二硫苏糖醇(DTT)溶解于蒸馏水中,配制成 1 摩尔/升的二硫苏糖醇(DTT)母液,调整抗体的浓度,使其浓度至少为 4 毫克/毫升。

②每毫升抗体溶液中加入 20 微升的二硫苏糖醇(DTT)母液,室温静置反应 30 分钟,将抗体的二硫键打开形成巯基。

③交换缓冲液预先平衡凝胶柱,将反应液过柱,收集抗体部分。

3、藻红蛋白和抗体的共价交联

①每毫克抗体加入 3.2 毫克的琥珀酰亚胺-4-(N-甲基马来酰亚胺)环已烷-1-碳酸酯)(SMCC)衍生化的PE,铝箔封好后于室温旋转反应 60 分钟,使马来酰亚胺基和抗体上的巯基实现共价交联。

②0 毫克的 N-乙基马来酰胺(NEM)溶解于 1.0 毫升的无水二甲基亚砜(DMSO)中制成 N-乙基马来酰胺(NEM)母液(现配现用)。

③每毫克抗体中加入 3.4 微升N-乙基马来酰胺(NEM)母液,铝箔封好后于室温旋转反应 60 分钟, 反应后,使抗体上的巯基封闭。

4、交联物的存储

将交联物于存储缓冲液中透析后保存于2-8℃。

【联系方式】

座机:0535-3800305


手机:17362126717


地址:山东省烟台市高新区科技大道39号


邮箱:liuchuanyu@crystalbiosystems.com


网站:www.crystalbiosystems.com


联系人 刘经理
快速获取联系方式

扫一下快速获取该企业联系方式 推荐使用 微信 我查查 等扫码工具

扫描后可直接保存为手机联系人 (推荐)
电话 0535-3800305
手机 17362126717
传真 0535-3800305
地址 高新区科技大道39号

同类产品推荐

烟台科瑞斯生物

价格面议

最小起订量:

可售数量:

批发采购: 不支持

在线询价
x
承办单位:云南省工业和信息化委员会中小企业处 技术支持:厦门二五八集团有限公司 邮箱地址:Service@smeyn.com 联系电话:(0871)68358001 68358002 68358003

2006-2009 版权所有 滇ICP备05008935号

增值电信业务经营许可证:滇B1、B2-20060036号

闽公网安备 35020502000007号